I sistemi operativi Windows a 32 bit consentono l'esecuzione di software a 16 bit per mezzo di un apposito sotto-sistema denominato WOW (Win16 On Win32), ma un software a 16 bit non può essere eseguito in alcun modo all'interno di un sistema operativo a 64 bit.
Se il tuo software funziona con precedenti versioni di Windows, ti consiglio di ricorrere alla virtualizzazione: se hai Windows 7 Professional o Ultimate scarica ed installa Windows Virtual PC con XP Mode (http://www.microsoft.com/italy/windows/virtual-pc/default.aspx), per avere a disposizione un ambiente Windows XP Professional SP3 a 32 bit in cui installare ed eseguire il tuo programma; oppure, installa un programma di virtualizzazione, come Microsoft Virtual PC 2007 SP1 (http://www.microsoft.com/downloads/it-it/details.aspx?familyid=28c97d22-6eb8-4a09-a7f7-f6c7a1f000b5&displaylang=it) oppure Oracle VirtualBox (http://www.virtualbox.org), crea una macchina virtuale ed installa la versione di Windows di cui hai bisogno per eseguire il tuo programma.
Ricorda che devi avere valide licenze Retail per ogni sistema operativo che intendi virtualizzare.
Ciao.