WPF System.Windows.Data Error: 4 　実行時エラーの解消法

御回答誠にありがとうございました。
こちらでの確認結果ですが、
＞ループが１回だろうが７回だろうが関係なく、ListBoxItemにContentを設定して初期化するだけで発生するものです。
と、ありますが、ループを1回にすると、発生確率は激減します。ループ回数６回以上でエラーが発生するようになります。
PCの性能にも関係があるのかも知れませんが、WPFの内部処理とのタイミングが原因で発生しているように見えます。
まず、
<ListBox x:Name="LI3" VirtualizingPanel.IsVirtualizing="false" />
↑この方法ですが、投稿したサンプルプログラムではエラーが表示されなくなる効果がありましたが、ListBoxItemを継承した自作クラスに多くの容量を積載していくと、これでもエラーが出るようになりました。
次に、Dim item As New Myclass1() With {.OverridesDefaultStyle = True, .Content = i.ToString}　の御回答から
自作クラスのコンストラクターにme.OverridesDefaultStyle = True を設定することで、現在はエラーが発生しなくなっています。
    AddHandler item.Loaded, Sub(s, e)
                                item.Content = i.ToString()
                            End Sub
↑この方法は、次の対策として検討させていただきます。
動作したプログラムのソースを掲載します。
《xaml》
<Window x:Class="MainWindow"
 xmlns="http://schemas.microsoft.com/winfx/2006/xaml/presentation"
    xmlns:x="http://schemas.microsoft.com/winfx/2006/xaml"
    xmlns:local="clr-namespace:WpfApp1"
    Title="MainWindow" Height="360" Width="784">
    <Window.Resources>
        <Style TargetType="local:Myclass1">
            <Setter Property="Template">
                <Setter.Value>
                    <ControlTemplate TargetType="local:Myclass1">
                        <ContentPresenter HorizontalAlignment="Left" VerticalAlignment="Center"/>
                    </ControlTemplate>
                </Setter.Value>
            </Setter>
            <Setter Property="Height" Value="18"/>
        </Style>
    </Window.Resources>
    <Grid Margin="0,0,22,19" VerticalAlignment="Top">
        <ListBox x:Name="LI3" ScrollViewer.HorizontalScrollBarVisibility="Visible"
             HorizontalAlignment="Left" Height="98" Margin="53,188,0,0" VirtualizingPanel.IsVirtualizing="false"
             VerticalAlignment="Top" Width="180"/>
        <CheckBox x:Name="CX2" Content="ooo" HorizontalAlignment="Left"
              Margin="180,89,0,0" VerticalAlignment="Top" Width="105"
               FontSize="14" IsChecked="True"/>
    </Grid>
</Window>
《VB》
Imports System.Collections.ObjectModel
Imports System.Windows.Threading
Class MainWindow
   Private Sub MainWindow_Loaded(sender As Object, e As RoutedEventArgs) Handles Me.Loaded
      Dim l2 As New List(Of Myclass1)
      Dim i As Integer
      For i = 0 To 6 '1回のループでは、実行時エラーは発生しない
         Dim item As New Myclass1 With {.Content = i.ToString}
         l2.Add(item)
      Next
      'エラーは解消された
      'System.Windows.Data Error: 4 : Cannot find source for binding with reference 'RelativeSource FindAncestor, AncestorType='System.Windows.Controls.ItemsControl', AncestorLevel='1''. BindingExpression:Path=HorizontalContentAlignment; DataItem=null; target element is 'Myclass1' (Name=''); target property is 'HorizontalContentAlignment' (type 'HorizontalAlignment')
      'System.Windows.Data Error: 4 : Cannot find source for binding with reference 'RelativeSource FindAncestor, AncestorType='System.Windows.Controls.ItemsControl', AncestorLevel='1''. BindingExpression:Path=VerticalContentAlignment; DataItem=null; target element is 'Myclass1' (Name=''); target property is 'VerticalContentAlignment' (type 'VerticalAlignment')
      'System.Windows.Data Error: 4 : Cannot find source for binding with reference 'RelativeSource FindAncestor, AncestorType='System.Windows.Controls.ItemsControl', AncestorLevel='1''. BindingExpression:Path=HorizontalContentAlignment; DataItem=null; target element is 'Myclass1' (Name=''); target property is 'HorizontalContentAlignment' (type 'HorizontalAlignment')
      'System.Windows.Data Error: 4 : Cannot find source for binding with reference 'RelativeSource FindAncestor, AncestorType='System.Windows.Controls.ItemsControl', AncestorLevel='1''. BindingExpression:Path=VerticalContentAlignment; DataItem=null; target element is 'Myclass1' (Name=''); target property is 'VerticalContentAlignment' (type 'VerticalAlignment')
      Me.LI3.ItemsSource = l2
   End Sub
   Private Sub CX2_Checked(sender As Object, e As RoutedEventArgs) Handles CX2.Checked
      Dim l2 As New List(Of Myclass1)
      Dim i As Integer
      For i = 0 To 6 '1回のループでは、実行時エラーは発生しない
         Dim item As New Myclass1 With {.Content = i.ToString}
         l2.Add(item)
      Next
      Me.LI3.ItemsSource = l2
   End Sub
End Class
Class Myclass1
   Inherits ListBoxItem
   Public Property b1 As Boolean 'ダミー
   Public Sub New()
      Me.OverridesDefaultStyle = True '対策
   End Sub
End Class